Quien este en contra

FALO

Producción de la insulina: cuando se empezó a tratar la diabetes se empezó a usar la insulina de cerdos y otros mamíferos, pero no tenía la misma efectividad. La de hoy en día se produce con la ingeniería genética. La insulina consta de dos polipéptidos: la cadena A y la cadena B que se encuentran unidas por puentes disulfuro. Introducir el gen que da lugar a la proinsulina completa que se aísla cortando. Se transforma un cultivo bacteriano que aísla A y B. bromuro de cianógeno

Vacunas recombinantes: virus de vacuna, con ADN doble, se vacuna contra la viruela.

Algunas proteínas son propensas a la degradación por proteasas intracelulares del hospedado de clonación. Además, algunas proteínas eucarióticas son tóxicas para el hospedador procariótico. Por ello, se debe modificar el vector de expresión para eliminar estos problemas. La proteína resultante puede no plegarse de forma correcta en el hospedador procariótico. Este problema se solventa usando una proteína de fusión, que normalmente si la proteína de intereses se pega a * se pliega tridimensionalmente. Esto se realiza en vectores de fusión.

Vectores de expresión: cuando el vector puede utilizarse no sólo para clonar un gen, sino que además contiene las secuencias reguladoras necesarias para la expresión de ese gen. Uno de los factores fundamentales de estos vectores es la regulación de la transcripción. Para ello deben contener un promotor que funcione de forma eficaz en el hospedador. El vector además se debe diseñar de tal modo que se garantice la transducción de forma eficaz.

Una vez que tenemos los fragmentos de interés se ligan en el plásmido. Podemos seleccionar aquellos genes que incluyan el plásmido, las bacterias que no tienen el plásmido mueren.

Etapas en la clonación de ADN recombinante: preparación del inserto de ADN a clonar y preparación del vector (enzimas de restricción, las corta), unión del fragmento de ADN al vector (ligasas), introducción del ADN recombinante en una célula, propagación celular y selección del clon con el gen de interés, análisis del ADN recombinante clonado.

Tipos de hospedadores de clonación: procarióticos (Escherichia coli, el más importante, y Bacillus subtilis) y eucarióticos (Saccharomyces cerevisiae, células de mamíferos). El hecho que seleccionemos uno u otro implica que el producto tenga unas propiedades determinadas.

Tipos de vectores: cromosomas artificiales (tienen un centrómero y unas telomerasas en los extremos pero nos permite insertan secuencias extrañas, se usan para levaduras yac, y células de mamíferos), plásmidos y virus (infección, alta eficiencia).

Cómo se clona un gen: significa aislar un gen, introducirlo en un vector de clonación y este a su vez en un hospedador adecuado, donde se van a generar varias copias de ese gen. Esto lo hacemos para estudiar funciones de la proteína que codifica ese gen mutándolo y observando los resultados o para producir proteínas: la insulina procede de la industria biotecnológica. Necesitamos el vector de clonación (secuencia que nos permite obtener muchas copias del gen) y el transgen (gen transferido). Se utilizan unas tijeras moleculares o de restricción que cortan las secuencias específicas del gen que

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